ink) 由加拿大萨省治疗性抗体资源中心博士后、四川省千人计划专家刘江海博士和萨省治疗性抗体资源中心主任Ron Geyer博士于2016年3月创立,公司坐落于我国西部重要的生物产业孵化中心——成都市天府生命科技园,是园区重点培育的创新创业型企业,其核心技术被四川省经济和信息化委员会鉴定为国际领先水平。" />
核心技术
全合成人源化纳米抗体库
时间:2018-03-22

纳米抗体(Nanobody)或者VHH抗体(Variable domain of heavy chain of heavy-chain antibody)是指仅由重链抗体可变区组成的基因工程抗体,应用广泛的是骆驼VHH抗体。骆驼抗体天然缺失轻链,保留了重链的VH和CH2、CH3区域,容易构建VHH抗体。相对于人、鼠VH,骆驼VHH具有严格的单域结构特性,展现出稳定性高(常温保存)、水溶性好和易于表达纯化等优点。骆驼VH CDR3区域氨基酸长度更长,容易形成凸环结构深入抗原内部,使得骆驼VHH的抗原亲和力并不逊于全长的人、鼠lgG抗体。骆驼和人VH有>80%的同源性,3D结构重合,骆驼VHH的免疫原性弱,人源化简单;同时骆驼VHH FR2的疏水残基被亲水残基取代,水溶性好,避免了由蛋白质聚集导致的免疫原性增强。另外VHH分子量小,适合用于多价/多功能抗体和ADCMedication的构建,也适合作为胞内抗体。但纳米抗体存在半衰期短的劣势,需要Fc融合、PEG化等技术延长半衰期。


骆驼免疫和纳米抗体制备

骆驼经过4次的抗原免疫后,采集外周血,分离淋巴细胞,通过PCR、基因克隆、噬菌体展示构建免疫库(“迷你”抗体库,库容108)。再经过3-5轮体外筛选,挑选亲和力高的单克隆抗体并进行体外验证。




全合成人源化纳米抗体库技术

考虑到骆驼免疫、免疫库构建、抗体筛选和人源化改造的周期较长(6-12个月),动物免疫所需要的抗原量多(2mg左右),我们构建了全合成人源化VHH抗体库。其具有如下优点:1)抗体开发周期短,1-2个月可获得高亲和力纳米抗体;2)体外筛选,无需动物;3)抗原使用量少,常规开发只需要20ug抗原;4)通过外周血淋巴细胞PCR构建的天然库(免疫库和非免疫库)有效库容一般为106-108,而全合成库的库容量大,可达到1010,抗体筛选的成功率高;5)获得的是人源化纳米抗体,可以直接用于后续临床开发。