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羊驼天然VHH CAR-T库 Su^®Llama VHH CAR-TLibrary

制备步骤

1 采取未免疫的羊驼外周血液
2 分离淋巴细胞、提取总mRNA、反转录成cDNA
3 利用巢式PCR扩增VHH片段，使用Su^®Assemble kit将目的VHH克隆到Su^®Lenti-CAR表达载体中构建天然VHH DNA 文库
4 将Lenti-CAR表达载体和辅助质粒转染到293T 细胞中，生产慢病毒
5 感染Jurkat T 细胞，在其细胞膜表达VHH CAR，构建天然VHHCAR-T亚库
6 将多个亚库混合形成羊驼天然VHH CAR-T库（Su^®Llama VHH CAR-TLibrary）

Su^®Llama VHH Library特点

1 通过T细胞展示系统构建
2 包含10个亚库（sub-libraries），总库容为10⁸
3 VHH-CAR融合蛋白展示
4 筛选使用流式分选技术（cell sorting）富集CD69阳性细胞

人源化VHH CAR-T库 Su^®humanized VHH CAR-TLibrary

制备步骤

1 PCR扩增Su^®Humanized VHH Library的VHH片段，使用Su^®Assemble kit将VHH文库克隆到Su^®Lenti-CAR 表达载体中构建人源化VHH DNA 文库
2 将Lenti-CAR 表达载体和辅助质粒转染到293T 细胞中
3 用感染Jurkat T 细胞，在其细胞膜表达VHH CAR，构建人源化VHH CAR-T亚库

4 将多个亚库混合形成人源化VHH CAR-T库（Su^®humanized VHH CAR-TLibrary）

Su^®humanized VHH CAR-TLibrary特点

1 通过T细胞展示系统构建
2 固定CDR H1和H2区域，在CDR H3区域引入突变
3 CDR H3长度为10-20氨基酸
4 包含11个亚库（sub-libraries），总库容为10⁸
5 VHH-CAR融合蛋白展示
6 筛选使用流式分选技术（cell sorting）富集CD69阳性细胞

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