ink) 由加拿大萨省治疗性抗体资源中心博士后、四川省千人计划专家刘江海博士和萨省治疗性抗体资源中心主任Ron Geyer博士于2016年3月创立,公司坐落于我国西部重要的生物产业孵化中心——成都市天府生命科技园,是园区重点培育的创新创业型企业,其核心技术被四川省经济和信息化委员会鉴定为国际领先水平。" />
产品
以羊驼VHH为代表的纳米抗体技术发展迅速,Ablink构建了高质量的羊驼VHH天然库(Su®Llama VHH Library)和全合成人源化VHH抗体库(Su®Humanized VHH Library),帮助客户快速筛选针对目的蛋白的天然纳米抗体和人源化纳米抗体。

羊驼VHH天然库 Su®Llama VHH Library
制备步骤
1 采取未免疫的羊驼外周血液
2 分离淋巴细胞、提取总mRNA、反转录成CDNA
3 利用巢式PCR扩增VHH片段 ,使用Su®Assemble kit将目的VHH克隆到Su®short phagemid 载体中构建天然VHH DNA 文库
4 将DNA文库电转入超级感受态细胞SS320(含helper phage)中,构建天然VHH噬菌体库亚库
5 将多个亚库混合形成羊驼VHH天然库(Su®Llama VHH Library)

Su®Llama VHH Library特点
1 通过噬菌体展示系统构建
2 包含10个亚库( sub-libraries),总库容为1010
3 VHH-M13PIII融合蛋白单体展示
4 在VHH和M13 PIII之间插入琥珀密码子:在抑制性 (suppressor strains,如XL-1 Blue MRF’、TG1, DH5aF’、ER2738)中表达为VHH-M13PIII融合蛋白,展示在噬菌体表面;在非抑制性菌株(non-suppressor strains,如××××0F'、JS5菌株) 中表达为可溶性VHH蛋白,带c-Myc标签
5 建库使用超级感受态细胞SS320(含helper phage);筛选使用Su®DH5aF'+M13K07 Helper phage


全合成人源化VHH抗体库 Su®Humanized VHH Library
制备步骤
1 从天然VHH抗体库中分离出表达好、稳定性高的单克隆,进行人源化改造
2 挑选表达好、稳定性高的人源化单克隆VHH作为模板,克隆到Su®short phagemid 载体中
3 利用Su®Kunkel Mutagenesis Kits 对CDR区域进行高通量突变,构建突变VHH DNA文库
4 将DNA文库电转入超级感受态细胞SS320(含helper phage)中,构建突变VHH噬菌体库亚库
5 将多个亚库混合形成全合成人源化VHH抗体库(Su®Humanized VHH Library)

Su®Humanized VHH Library特点
1 通过噬菌体展示系统构建
2 固定CDR H1和H2区域,在CDR H3区域引入突变
3 CDR H3长度为10-20氨基酸
4 包含11个亚库( sub-libraries),总库容为1010
5 VHH-M13PIII融合蛋白单体展示
6 在VHH和M13 PIII之间插入琥珀密码子:在抑制性菌株 (suppressor strains,如XL-1 Blue MRF’、TG1, DH5aF’、ER2738菌株)中表达为VHH-M13PIII融合蛋白,展示在噬菌体表面;在非抑制性菌株(non-suppressor strains,如××××0F'、JS5菌株) 中表达为可溶性VHH蛋白,带c-Myc标签
7 建库使用超级感受态细胞SS320(含helper phage);筛选使用Su®DH5aF+M13K07 Helper phage


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